LC4 – Chromatographie Liquide (HPLC-UHPLC) – Optimisation et développement de méthodes

1) GENERALITES SUR LA CHROMATOGRAPHIE EN PHASE LIQUIDE
– Classification des méthodes
– Evolutions récentes (UHPLC)

2) INSTRUMENTATION
– Evolutions récentes/modification des pratiques (UHPLC)
– Détecteurs UV/Barrette de diode
– Détecteurs fluorimètre
– Détecteurs réfractomètre
– Détecteurs Diffusion de lumière
– Détecteurs Corona
– Détecteurs spectrométrie de masse
– Couplage LC/MS
– Précautions d’utilisation

4) MECANISMES DE SEPARATION
– Généralités
– Chromatographie en phase normale
– Chromatographie en phase inverse
– Chromatographie de partage
– Chromatographie d’absorption
– Chromatographie en mode HILIC
– Chromatographie d’échange d’ions/Paire d’ions
– Chromatographie d’exclusion stérique

5) GRANDEURS FONDAMENTALES
– Définition des grandeurs chromatographiques

6) COLONNES
– Généralités
– Relation nature/utilisation
– Evolutions récentes/modification des pratiques (UHPLC)
– Présentation des modèles de classification (UHPLC)

7) PROPRIETE DES SOLVANTS
– Généralités
– Compatibilité

8) PROPRIETE DES ANALYTES
– Généralités
– Présentation des propriétés physico-chimiques

9) PREPARATION ET UTILISATION D’UN SYSTEME LC
– Mise en route d’une analyse
– Précaution d’utilisation
– Calcul des grandeurs fondamentales
– Etude de séparation de deux composés

10) DEVELOPPEMENT DE METHODES
– Introduction à une démarche organisée
– Présentation d’une méthodologie de développement
– Choix raisonné de la colonne
– Choix raisonné de la phase mobile
– Choix raisonné du système de détection
– Utilisation des lois chromatographiques
– Exemples de développements HPLC et UHPLC
– Présentation d’exemples de DOE ( Design Of Experiment)

11) RESOLUTION D’ANOMALIES
– Anomalies courantes
– Anomalies complexes